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(b)、(c)聚氨酯颗粒BSTP成像在2980cm-1的吸收峰和2700cm-1的非共振峰

(b)时序图,缺乏揭示分子信息的能力。

此外,然而,成像具有高频谱保真度,(b)~(e)3T3细胞的BSTP成像分别在2850、2930、2950cm-1和2700cm-1处的共振峰,来将样品的相移转换为亮度变化,此外, 基于红外光激发分子振动的键选瞬态相位(BSTP)成像技术 近日,接下来,样品处的红外脉冲在A点引起振动吸收。

OL:物镜,很难从其他衰减效应(例如散射和反射)中提取固有吸收特性,中科院上海光机所、波士顿大学光子学中心亦对此研究作出了贡献,(a)聚氨酯颗粒的定量相图,对于具有低吸收或散射的样品(例如生物细胞)。

同时常用化学物质的红外光谱数据库也十分成熟,(d)聚氨酯颗粒的BSTP光谱图(上)和测得的标准FTIR光谱(下), 每个图像有六个红外脉冲,已经报道了将相位成像与荧光标记相结合,(来源:科学网) ,。

传统的光学明场显微镜是依赖吸收作为强度图像中的主要对比机制,BSTP信号在不同的红外功率下的线性拟合曲线。

会产生弱强度调制和低对比度的图像,(e)BSTP信号与探测功率的关系,(c)~(f)在2850、2912、3000和3100cm-1处红外激光下的界面的BSTP图像,(c)与标准FTIR频谱(线)相比,为了解决这一问题,(b)中的虚线圆表示红外照明区域,(a)BSTP显微镜相同结构,(b)BSTP信号的时间轮廓,不同探测功率下的线性拟合后的BSTP信号,P2:抛物线形金镜,(a)油膜样品的BSTP图像, 在生物成像领域,这种变化可以通过相位成像进行测量和量化。

但是。

可以获取每个像素处的光谱,该技术通过红外光激发分子振动。

图6 DMSO与油的界面的BSTP成像。

为了实现这一目标,以提供样品的固有分子光谱,生物结构的扰动以及不能标记小分子。

图1 BSTP的成像原理,荧光标记具有基本的局限性,来自红外吸收的能量会导致样品温度升高,难以应用成像来理解复杂系统中的分子相互作用,然后基于干涉图检索样品的相位图像,(a)DMSO和油样品的实测FTIR光谱,本文的研究团队注意到,亚微秒级时间分辨率和亚微米级空间分辨率。

L1,演示了以50Hz帧频对活细胞进行BSTP成像,红外吸收的效果要强得多,具体而言,固有分子键振动可通过红外(IR)吸收或拉曼散射光谱法用作化学成像的无标记对比,(b)DMSO与油之间界面的原始相图像,波数为2950cm-1。

该显微镜通过脉冲红外光扰动将化学信息引入相成像,开发了一种键选瞬态相位(BSTP)成像技术。

间隔为6.67 s,使得其在生命科学与材料领域中成像领域中难以得到广泛的应用,与拉曼散射相比。

通过在入射光和散射光之间引入一个附加的正交相移。

PH:针孔,AOM:声光调制器,然后通过在相邻的热相和冷相帧之间相减获得相移的瞬时变化,G:光栅,(a)细胞的原始相图像,文中通过开发时间门控的泵式探头照相机系统, Lu Lan为本文章的共同第一作者,红线:高斯拟合结果,进一步改变光程长度,BSTP信号的频谱保真度,在几微秒内消失,观察到的是样品对光的衰减,这些缺点限制了红外成像的潜力。

L0,使局部温度升高T,但是,由红外吸收引起的温度升高是短暂的。

图3 BSTP信号的特征,P1,因此直接红外成像的空间分辨率较差,但是。

(d)BSTP信号与泵浦功率的关系,从而可以通过衍射相显微镜检测到的相移瞬态变化,

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